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避免牛血清產(chǎn)生沉淀的方法有哪些？
點(diǎn)擊次數(shù)：1492 更新時(shí)間：2019-11-26
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。牛血清提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。牛血清提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。牛血清是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。起酸堿度緩沖液作用。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)該遇到過(guò)使用的牛血清產(chǎn)生沉淀的問(wèn)題，溶解后有沉淀，往往還怕是染菌，即使不是染菌有些沉淀在細(xì)胞瓶?jī)?nèi)也會(huì)影響生長(zhǎng)，注意一些小的細(xì)節(jié)還是非常有必要的。
小技巧之避免牛血清沉淀：
一般推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。
解凍牛血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。
解凍牛血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。
請(qǐng)勿將牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。
若必須做牛血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。
溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成牛血清沉淀物的增多
